細胞離心機離心分離純化法可以避免二次污染
2020-03-26(1361)次瀏覽(lan)
通(tong)過(guo)(guo)離心技術使得細胞分(fen)離,是一(yi)種物(wu)質分(fen)離,不通(tong)過(guo)(guo)介質,就不出現二(er)次污染(ran)。
細胞離心(xin)機采用的就是離心(xin)分離純化法:
離(li)(li)心(xin)(xin)方法,包括差速(su)離(li)(li)心(xin)(xin)法和(he)(he)(he)密(mi)度(du)(du)梯度(du)(du)離(li)(li)心(xin)(xin)法,密(mi)度(du)(du)梯度(du)(du)離(li)(li)心(xin)(xin)法又分(fen)為(wei)速(su)度(du)(du)-區帶密(mi)度(du)(du)梯度(du)(du)離(li)(li)心(xin)(xin)法和(he)(he)(he)等密(mi)度(du)(du)梯度(du)(du)離(li)(li)心(xin)(xin)法。在選用合理(li)的(de)方法對(dui)細(xi)胞或組織進行破(po)碎后,首(shou)先要進行差速(su)離(li)(li)心(xin)(xin)法,即根(gen)據不同離(li)(li)心(xin)(xin)速(su)度(du)(du)所產生的(de)不同離(li)(li)心(xin)(xin)力將各種細(xi)胞組分(fen)和(he)(he)(he)顆粒分(fen)離(li)(li)開(kai)來。各種細(xi)胞器和(he)(he)(he)顆粒典型的(de)差速(su)離(li)(li)心(xin)(xin)順序(xu)見下表。
細(xi)(xi)(xi)胞離(li)心(xin)機(ji)(ji)是利用(yong)離(li)心(xin)力對混合液(含(han)有固形(xing)物(wu))進行(xing)分離(li)和沉(chen)淀的(de)一種專用(yong)儀(yi)器。細(xi)(xi)(xi)胞離(li)心(xin)機(ji)(ji)有低(di)速(su)(su)、高(gao)速(su)(su)離(li)心(xin)機(ji)(ji)和低(di)速(su)(su)、細(xi)(xi)(xi)胞離(li)心(xin)機(ji)(ji),以(yi)(yi)及超速(su)(su)分析、制備兩用(yong)冷凍(dong)離(li)心(xin)機(ji)(ji)等多(duo)種型號(hao)。而(er)細(xi)(xi)(xi)胞離(li)心(xin)機(ji)(ji)是帶制冷系(xi)統(tong)的(de)高(gao)速(su)(su)離(li)心(xin)機(ji)(ji)。這種離(li)心(xin)機(ji)(ji)的(de)離(li)心(xin)腔溫度通常(chang)可(ke)(ke)降(jiang)至零攝氏度以(yi)(yi)下。轉速(su)(su)可(ke)(ke)達10000rpm以(yi)(yi)上,具有冷凍(dong)離(li)心(xin)機(ji)(ji)的(de)性能和結(jie)構外,細(xi)(xi)(xi)胞離(li)心(xin)機(ji)(ji)所用(yong)角式轉頭(tou)多(duo)采(cai)用(yong)用(yong)鈦合金或(huo)鋁合金制成。離(li)心(xin)管為具蓋聚(ju)乙烯硬塑料制品。這類離(li)心(xin)機(ji)(ji)多(duo)用(yong)于(yu)收集微生物(wu)、細(xi)(xi)(xi)胞碎片、細(xi)(xi)(xi)胞、大的(de)細(xi)(xi)(xi)胞器、硫酸沉(chen)淀物(wu)以(yi)(yi)及免疫沉(chen)淀物(wu)等。那么,操作細(xi)(xi)(xi)胞離(li)心(xin)機(ji)(ji)需要重點關注的(de)問題有哪(na)些呢?
操作細胞離心機需要注意的事項:
1.離心管(guan)內裝(zhuang)載的溶(rong)液量必須(xu)合適,不銹鋼管(guan)無蓋,只能(neng)裝(zhuang)2/3,塑料(liao)管(guan)可裝(zhuang)至(zhi)肩部。管(guan)蓋必須(xu)蓋嚴絕不允許漏液。空管(guan)離心會變形。塑料(liao)管(guan)使用有機溶(rong)劑(ji)必須(xu)符合規定(ding)。
2.離心管(guan)必須成(cheng)對放(fang)置(zhi),必須嚴格平衡,偏差<0.1g。
3.不允許無轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)頭(tou)空轉(zhuan)(zhuan)(zhuan),放取轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)頭(tou)必須用手柄,以防轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)頭(tou)滑(hua)落。轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)頭(tou)要(yao)輕(qing)放、卡穩,旋下手柄時要(yao)用手扶住手柄只(zhi)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)頭(tou)。轉(zhuan)(zhuan)(zhuan)頭(tou)蓋要(yao)蓋嚴,無蓋不準離心。
4.細胞離(li)心(xin)機離(li)心(xin)時不(bu)準打開機蓋,不(bu)準扒(ba)扶在離(li)心(xin)機上,如有(you)異(yi)常聲音和振動時立即停機。
5.轉頭(tou)(tou)使用后必須及時由轉頭(tou)(tou)室中取出、擦干(gan),用擦孔棒(bang)將管孔仔細擦凈(jing)。如(ru)有溶液溢出必須清洗干(gan)凈(jing),擦凈(jing)轉頭(tou)(tou)室內凝(ning)水,開門涼(liang)干(gan)轉頭(tou)(tou)室。
6.使用離心機必須預約,用后必須登記(ji)。
7.未經過培(pei)訓和考核(he)者不能(neng)使用。
8.選擇合適的轉頭(tou)和轉速(su),絕不可超速(su)使用(yong)。
9.選(xuan)擇(ze)合適的溫(wen)度(du),通常4℃,除有(you)機溶劑外不要(yao)低于零下(xia),以免冰凍,損壞離(li)心管和轉頭(tou)。
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